Introducción
El encanto foliar, el patrón de abigarramiento y textura de las hojas, y su tolerancia a la luz solar limitada hacen de las Alocasias una de las plantas más populares entre los jardineros paisajistas y recolectores de plantas.
Alocasia comprende alrededor de 100 especies y es un género morfológicamente diverso de la familia Arecaceae. Los miembros se utilizan ampliamente para varios propósitos. Sus hojas, raíces, y el tallo se utilizan con fines comestibles en algunos lugares, y la planta Taro gigante tiene muchas propiedades medicinales que incluyen antidiarreico, antifúngico y propiedades antiinflamatorias.
Las propiedades medicinales y la belleza de la planta la hacen muy deseada entre las personas. La enorme demanda de estas plantas en el espacio comercial ha llevado a los científicos a encontrar una mejor alternativa para satisfacer la demanda del mercado. Y, Las herramientas de cultivo de tejidos han demostrado ser excelentes técnicas para cumplir con todos los propósitos antes mencionados.
Este artículo presenta una descripción de la Alocasia géneros y sus miembros y además, lo llevará al cultivo de tejidos de esta planta y su procedimiento.
Acerca de Plant
Alocasia es un género con especies de plantas de floración perenne tuberosa que tienen hojas anchas y rizomas. Las plantas suelen crecer de 2 a 6 pies de altura.
Las hojas de las plantas tienen un pedúnculo largo, en forma de punta de flecha a forma de corazón que están decoradas y adornadas con colores en diferentes tamaños, de 8 "a 36" de largo, dependiendo de la especie. Las plantas se llaman comúnmente orejas de elefante debido a la semejanza de sus hojas con las grandes orejas de elefante.
Son nativos de las selvas tropicales, sitios de vegetación secundaria, y a lo largo de arroyos o lugares pantanosos de la India, El sudeste de Asia, y el sur de China a través de las islas del Pacífico Sur (en particular Filipinas, Islas Carolinas, e Indonesia) al este de Australia.
Alocasia ha sido el colmo de la moda para los jardineros, culturistas, y recolectores de plantas desde hace más de 150 años. Estas plantas se recolectan y venden a gran escala para cumplir con la escala comercial.
La existencia de varias especies de los géneros se ha visto amenazada debido a la recolección continua y la destrucción del hábitat. La presión de proteger estas plantas se puede aliviar utilizando técnicas de micropropagación in vitro.
Cultivo de tejidos de Alocasia
El cultivo de tejidos ha sido una herramienta biotecnológica esencial en los laboratorios de plantas debido a su gran potencial para la propagación de plantas medicinales de alto valor. fabricación de productos naturales de alta calidad, y producción rápida y masiva de plantas.
Es la mejor alternativa para la producción de metabolitos vegetales de importancia medicinal, multiplicación rápida de especies en peligro de extinción o raras, producción de plantas libres de enfermedades, y transformación del genoma de la planta.
Muchas empresas han utilizado la técnica de cultivo de la punta de los brotes para producir muchos clones de aroides libres de enfermedades desde 1974 (Hartman).
Aquí, Se ha cubierto un procedimiento para el cultivo de tejidos de Alocasia longiloba utilizando semillas, que se toma del estudio de Abdulhafiz, F., Mahoma, A., Kayat, F., Zakaria, S., Hamzah, Z., Reddy Pamuru, R., Hamzah Z., Reduan, M. F. H. (2020). Micropropagación de Alocasia longiloba Miq y propiedades antioxidantes comparativas de extractos etanólicos de la planta cultivada en el campo, Callo Propagado In Vitro y Derivado In Vitro. Plantas 9 (7), 816. doi:10.3390 / plants9070816
Procedimiento
- Material vegetal y preparación de semillas:
- Recoge los frutos de A.longoliba y lávelos con agua corriente y luego enjuague con agua destilada estéril para eliminar el polvo por completo. Luego, separe las semillas con cuidado a mano y séquelas a temperatura ambiente durante dos semanas.
- Prueba de viabilidad de semillas:
- Embeber unas pocas (100 o más) semillas en agua destilada estéril durante 18 ha 25 ± 2 ° C para ablandar el tegumento y activar los sistemas enzimáticos.
- Sumergir las semillas en una solución de tetrazolio al 1% (pH 7,0 ± 2) e incubar a 45 ° C durante 6 h en la oscuridad.
- Al final del período de incubación, lavar las semillas con agua destilada esterilizada y observar al microscopio el cambio de color. Luego, calcular el porcentaje de viabilidad como el número de embriones teñidos / no total. de embriones multiplicado por 100.
- Esterilización de la superficie de la semilla:
- Lave las semillas secas de A. longiloba con agua corriente del grifo durante 30 min.
- Esterilizar la superficie de las semillas con una concentración de Clorox al 40% (hipoclorito de sodio al 5,25%) con unas gotas de Tween-20.
- Agite las semillas en un agitador orbital a 80 rpm durante 20 min.
- Lave las semillas esterilizadas con agua destilada estéril para eliminar un rastro de Clorox y luego seque en el estudio de filtro Whatman esterilizado (90 mm).
- Tratamiento de pre-germinación:
Para romper la latencia de la semilla y maximizar la germinación de la semilla, siga el procedimiento para tratar semillas:
- Escarifique las semillas con ácido sulfúrico al 30% (H2SO4) durante 15 min y luego enjuague con agua destilada durante 10 min para eliminar los rastros de solución ácida.
- Esterilícelos en superficie con Clorox al 40% durante 20 min y luego lávelos con agua destilada estéril tres veces cada vez durante 1 min.
- Cultivar las semillas en un medio compuesto por medio MS, suplementado con 30 g L − 1 de sacarosa, 2,78 g L − 1 Gelrite sin regulador de crecimiento vegetal.
- Ajustar el pH a 5,7 ± 0,2 antes de agregar agar y luego esterilizar en autoclave a 121 ° C a 103 kPa durante 20 min.
- Incubar los cultivos a 25 ± 2 ° C con un fotoperiodo de 16 h proporcionado por luces fluorescentes blancas frías.
- Inducción y multiplicación de brotes in vitro:
- Utilice las semillas cultivadas in vitro de cuatro semanas en esta etapa.
- Retire el cotiledón, hipocótilo y la raíz con cuidado.
- Inocular aproximadamente 2-3 cm de la punta del brote en medio MS suplementado con citoquinina 6-bencil amino purina (BAP), a 3 mg L − 1.
- Para la inducción de callos:
- Trate las semillas con ácido sulfúrico al 30% durante 15 minutos seguido de esterilización de la superficie con Clorox al 40% durante 20 minutos.
- Luego, lave los explantes con agua destilada estéril para eliminar las trazas de Clorox.
- Inocular asépticamente las semillas desinfectadas en un frasco que contenga aproximadamente 25 ml de medio (medio MS suplementado con 3 mg L-1 de IAA) para la inducción de callos.
- Incubar los cultivos a 25 ± 2 ° C bajo luz fluorescente fría con un ciclo de luz / oscuridad de 16/8 h.
- Para enraizamiento in vitro:
- Cultive los brotes aislados (2-3 cm) de cultivos de brotes múltiples en frascos de vidrio que contengan 20 mL de medio MS suplementado con ácido indol-3-acético a 0.5 mg L − 1, suplementado con 30 g L − 1 de sacarosa y 8 g L − 1 de agar en un fotoperiodo claro / oscuro de 16/8 h.
- Después de 4 semanas, saque con cuidado las plántulas enraizadas bien desarrolladas (8–9 cm de altura) de los recipientes de cultivo y lávelas abundantemente con agua corriente del grifo.
- Luego, enjuague las raíces con agua para eliminar el medio de agar.
- Mantener las plántulas en la sala de cultivo a una temperatura de 25 ± 2 ° C durante 5 días antes de transferirlas al invernadero.
- Después de cinco días, Plante las plántulas en una maceta de plástico pequeña de 20 × 15 cm que contenga un medio de tierra con una combinación de tierra vegetal y turba en una proporción de 1:2.
Siga observando su planta y registre su crecimiento y observe cualquier cambio negativo para tomar acciones instantáneas antes de que sus cultivos se echen a perder por completo.
Y, si este protocolo funciona para usted, háganoslo saber en [email protected].
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