Introducción
Los reguladores del crecimiento de las plantas sintetizados por las plantas son necesarios para su crecimiento y desarrollo. Pero, para inducir la misma respuesta dentro de un laboratorio en condiciones artificiales, requiere la adición de reguladores exógenos del crecimiento de las plantas al medio.
Hoy dia, varios reguladores del crecimiento de plantas naturales y sintéticos (PGR), hormonas vegetales, o fitohormonas están disponibles para su uso en experimentos de cultivo de tejidos. ¡Pero cómo preparar una solución de PGR es un problema o confusión más común que enfrentan nuestros cultivadores!
Entonces, en este articulo, hemos cubierto cómo preparar la solución madre de reguladores del crecimiento de las plantas y la solución madre de NaOH (disolvente) necesaria para disolver la hormona en forma de polvo.
¿Cómo preparar una solución stock de PGR?
Para preparar la solución madre de cualquier regulador de crecimiento vegetal, siga los pasos que se indican a continuación:
- Tome 50 ml de tubo de halcón por cada hormona para la que esté dispuesto a preparar el caldo.
- Etiquete cada tubo correctamente con el nombre de la hormona.
- Para preparar una solución de trabajo de hormona de crecimiento vegetal de 1 mg / L, preparar 1g / L de solución con agua.
- En el video, estamos midiendo 0.05 gramos (50 mg) de la forma en polvo de la hormona para preparar una solución madre de 50 ml.
- Puede usar una taza y una espátula para medir cada regulador de crecimiento de las plantas. Pero, debe cambiar la taza y limpiar o cambiar la espátula cada vez que mida otro regulador de crecimiento de plantas para evitar cualquier contaminación cruzada de sus soluciones madre.
Nota:De la botella de 100 gramos de reguladores del crecimiento de las plantas de un PCT, puede preparar 100 litros de solución madre. Sin embargo, solo necesita 1 ml de solución madre para preparar 1 litro de medio. Entonces, en general, puede preparar 100.000 litros de medio por botella.
- El siguiente paso es disolver la forma en polvo del regulador de crecimiento. No se disuelve directamente en agua, entonces necesitas un solvente.
- Utilice NaOH como disolvente para disolver la forma en polvo del regulador de crecimiento.
- Con una micropipeta, mida 1 ml de NaOH y agréguelo al tubo Falcon de 50 ml que contiene el regulador de crecimiento en polvo. Mézclelo correctamente y cambie las puntas de las pipetas antes de pasar a mezclar los siguientes reguladores del crecimiento para evitar cualquier contaminación cruzada entre hormonas (si está preparando una solución madre de hormonas vegetales de más de una hormona).
También puede usar el agitador pequeño o agitar el tubo o la botella para disolver la hormona en polvo en el solvente.
Nota:El procedimiento para preparar NaOH 1 M se describe a continuación. Entonces, tome 1 ml de NaOH de la solución 1 M preparada para disolver los reguladores del crecimiento de las plantas.
- Luego agregue 49 ml (porque ya ha agregado 1 ml de NaOH para disolver la hormona en polvo) de agua destilada con una pipeta para obtener 50 ml de la solución madre de la hormona.
- Luego, es hora de esterilizar la solución madre, ya que no son estériles. Debe saber acerca de su hormona si es resistente al calor o no.
- Si la hormona no es resistente al calor, debe filtrar con jeringa la solución después de que el medio se haya enfriado a al menos 60 grados centígrados y, si es resistente al calor, puede esterilizar la solución en autoclave.
- Entonces su solución madre está lista para usar en su experimento. Puede diluirlo para llevarlo a la concentración deseada.
¿Cómo preparar una solución de NaOH 1 M?
El hidróxido de sodio (NaOH) se usa para aumentar el pH de los medios de cultivo o disolver la forma en polvo del regulador del crecimiento.
- Para preparar la solución madre de NaOH necesita gránulos de NaOH, una espátula, Matraz Erlenmeyer.
- Agregue 100 ml de agua destilada al matraz Erlenmeyer con la pipeta.
- Para hacer una solución molar de NaOH, necesita la fórmula:
Molaridad =no. de moles de soluto / 1 litro
Y, un mol de hidróxido de sodio =40 gramos
Entonces, si desea preparar 1 M de solución de NaOH, necesita 40 gramos de NaOH disueltos en 1L de la solución.
Pero, aquí estamos preparando solo 100 ml de la solución madre, así que por eso, solo necesita 4 gramos de NaOH disueltos en 100 ml de agua.
- Mida 4 gramos de NaOH con una espátula en una báscula.
- Agregue los gránulos de NaOH medidos en agua y, con un agitador, hágalo una solución homogénea.
- Una vez disueltos los gránulos, transfiera la solución a la botella de almacenamiento.
- Su solución de NaOH 1 molar está lista para usar en sus experimentos.
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